Diskussion:Klenow-Fragment
Das Klenow Fragment besitzt keine Exonucleaseaktivität... Das ist der einzige Grund weshalb man dieses Fragment überhaupt benutzt... Quelle T.A. Brown, 5. Aufl. 2007 S.64f
- Das ist so nicht ganz richtig. Das Klenow-Fragment besitzt neben der Polymerase-Aktivität auch eine 5'→3' Exonuklease-Aktivität. Nur die 3'→5' Exonuklease-Aktivität der DNA-Polymerase I fehlt (siehe auch hier). Viele Grüße, --Hoffmeier 12:00, 24. Feb. 2008 (CET)
- Sorry, natürlich andersrum. Also 3'→5' Exonuklease-Aktivität (Proofreading), aber keine 5'→3' Exonuklease-Aktivität. --Hoffmeier 22:30, 14. Mai 2008 (CEST)
Mit Hilfe einer Proteasebehandlung (Trypsin) lässt sich die DNA-Polymerase I von Prokaryoten in folgende Bestandteile spalten: 5´3´-Exonuklease und das Klenow-Fragment (Polymerase und 3´5´-Exonuklease)! Quelle: R. Knippers, 9 Auflage S. 178 (steht auch so in anderen Lehrbüchern!)
Nick Translation
[Quelltext bearbeiten]Für die Nick-Translation werden meiner Meinung nach beide Funktionen des Klenow Fragmentes benötigt, da nur ein Einzelstrangbruch vorhanden ist, müssen die Nukleotide durch Exonukleseaktivität in 3'-5' entfernt werden und daraufhin durch (markierte) Nukleotide ersetzt werden -- 92.227.78.252 15:26, 27. Sep. 2009 (CEST)
- Das Klenow-Fragment besitzt keine 5'-3' Exonukleasefunktion mehr. Deshalb kann es auch nicht für die Nick-Translation verwendet werden. Der ursprüngliche Satz, sowie die "Korrektur" vom 27.09. sind wohl falsch. Habe aber selbst noch keine Nick-Translation durchgeführt... --Jann 21:30, 5. Okt. 2009 (CEST)
- Jepp, völlig richtig. --Hoffmeier 03:04, 6. Okt. 2009 (CEST)