Ab dem 24. April 2016 konnten die Fans online die Teilnehmer der beiden Ligen am All-Star Game wählen. Die Abstimmung lief bis zum 30. Juni 2016 und jedermann war berechtigt 35 Mal abzustimmen, allerdings maximal fünf Mal binnen 24 Stunden.[2] Die Spieler, die auf ihrer jeweiligen Position die meisten Stimmen bekommen, stehen in der Startaufstellung für ihre jeweilige Liga.
1 Wade Davis fällt verletzt aus. 2 Corey Kluber ersetzt den verletzten Marco Estrada im Kader der AL. 3 Aaron Sanchez ersetzt den verletzten Craig Kimbrel im Kader der AL. 4 José Quintana ersetzt den verletzten Danny Salazar im Kader der AL.
* Yoenis Céspedes, Dexter Fowler und Matt Carpenter fehlen verletzt. 1 Bartolo Colón ersetzt Madison Bumgarner im Kader der NL. 2 Clayton Kershaw fällt verletzt aus. 3 Drew Pomeranz ersetzt den verletzten Noah Syndergaard im Kader der NL. 4 Max Scherzer ersetzt den verletzten Stephen Strasburg im Kader der NL.